更新時(shí)間:2023-10-30
豬源性成分(Porcine)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品口腔角質(zhì)細(xì)胞(HOK)( 5×105 ) NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Rattus9-(2-羥丙基-d6)腺嘌呤9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine美國進(jìn)口猴腎細(xì)胞;Vero IgCD4(R)-9-(2-羥丙基)腺嘌呤(R)-9-[2-(Hydroxypropyl] Adenine美國進(jìn)口FST Others Mous
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:豬源性成分(Porcine)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96937
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
HBE(支氣管上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基CM去噻唑基甲基 Desthiazolylmethyl Ritonavir美國進(jìn)口
腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells(1ml)N-去甲基-d4N-Desmethyl Rosiglitazone-d4美國進(jìn)口
RPRD1B Others Human RPRD1B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (鉀鹽)Rosiglitazone (potassium salt)美國進(jìn)口
小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180鹽酸鹽rosiglitazone 美國進(jìn)口
HPAEC細(xì)胞,肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 猴腎細(xì)胞系,BSC-1細(xì)胞 CL-0082F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×25-羥基5-Hydroxy Rosiglitazone美國進(jìn)口
OLFM4 Others Human OLFM4 / Olfactomedin-4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6
CM-H053平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL氘代DMSO-D6(10 g )D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6
DIRAS3 Others Human ARHI / DIRAS3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進(jìn)分)≥30units/mg protein,sigma分裝Proteinase K
海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-h蛋白酶K(Sigma)≥30units/mg protein,sigma原裝Proteinase K
Hs 181.Tes細(xì)胞,正常細(xì)胞 癌細(xì)胞,HCC1937細(xì)胞 平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf抑制劑進(jìn)分Chymostatin
豬源性成分(Porcine)核酸檢測試劑盒脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞HAMEC抗壞血酸;維生素CAR;>99%Ascorbic acid;vitamin C
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維生素C()含量測定Ascorbic acid;vitamin C
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺AROctadecanamine
NCI-H157細(xì)胞,非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 小鼠肉瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL山梨酸AR,99%Sorbic acid
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇HPLC≥98%,DL-Menthol
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。