訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：斑點(diǎn)熱立克次體核酸檢測試劑盒
規(guī)格：50T
編號：BH-P96618
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
SW038-C2-tk細(xì)胞，轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細(xì)胞 副溶血性弧菌 臍靜脈平滑肌細(xì)胞RNAHUVSMC miRNA5 μg潑尼Prednisone>98%,USP30,BR

SK-N-MC(神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2潑尼()PrednisoneHPLC>98%,

Hep 3B(肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0434SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 腎小管上皮細(xì)胞;HKC堿/一水合物Doxycycline monohydrate/Doxycycline base>900μg/mg,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

組織細(xì)胞瘤細(xì)胞;U937 [U-937]唑來1酸Zoledronic acid hydrate>99%,一水化合物,BR

LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 唑來1酸（）Zoledronic acid hydrateHPLC>98%,
MDA-MB-435細(xì)胞，癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 鼠癌細(xì)胞系,MA-782細(xì)胞 原代滑膜皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells　500/100mlL-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-乙酯鹽酸鹽>98%(T),BRL-Mine ethyl ester

PATU8988(胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-乙酯鹽酸鹽0.98L-Tyrosine ethyl ester 

HDLEC adult Pellet 類皮膚管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊(成年捐獻(xiàn)者) > 1 mio.cells 角質(zhì)細(xì)胞生長添加物(不含BPE)KGS-2L-天冬氨酸-β-芐酯/L-天冬氨酸-4-芐酯>98%,BRL-Aspartic acid β-benzyl ester

CL-0324BT-20(癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-半甲酯鹽酸鹽>98%,BRL-Cysteine methyl ester

ROR1 Others Human  ROR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甲酯鹽酸鹽>98%,BRGlycine methyl ester
斑點(diǎn)熱立克次體核酸檢測試劑盒EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標(biāo)簽)4-(N,N-二苯氨基)苯(>98.0%(GC)(N))>98.0%(GC)(N)4-(N,N-Diphenylamino)benzaldehyde

Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1三(4-苯)胺(>96.0%(GC))>96.0%(GC)Tris(4-iodophenyl)amine

小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML賓雪德拉氏綠隱色堿(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)Bindschedler's Green Leuco Base

CLEC7A Others Human  CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙(4-苯基)胺(>98.0%(GC))>98.0%(GC)Bis(4-iodophenyl)amine

胃癌細(xì)胞;MKN-451-溴芘(>94.0%(GC))>94.0%(GC)1-Bromopyrene
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。