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燈心草染料法PCR鑒定試劑盒*

更新時間:2024-12-04

簡要描述:

燈心草染料法PCR鑒定試劑盒*公司相關產(chǎn)品 Base
2′-脫氧胸苷-5′-二磷酸三鈉鹽95648-78-5 dTDP 類桿菌-膽汁-七葉苷(BBE)瓊脂 BBE Agar
2′-脫氧尿苷951-78-0 2′-dU 酪蛋白瓊脂 Casein Agar
2′-脫氧尿苷-5′-單磷酸二鈉鹽42155-08-8包裝 dUMP

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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

燈心草染料法PCR鑒定試劑盒*

英文名稱

Medulla junci

貨號

BH-P99494

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,43,2
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
腎皮層上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)去氧膽酸Deoxycholic acid質(zhì)量規(guī)格:>95.0%

NRG1 Others Human NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) β-環(huán)糊精β-Cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,藥用級

大鼠腎上皮細胞*培養(yǎng)基 100mLRamipril質(zhì)量規(guī)格:>98.0,BR

MR1 [derivative of HB-11048]中國倉鼠X小鼠B細胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(標準品)Ramipril質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98,標準品

IGFBP6 Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標簽)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
猴腎細胞;Vero IgCD4硫化鐵 (II)(>70%,BR)Iron (II) sulfide質(zhì)量規(guī)格:>70%,BR

NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人細胞裂解液 (陽性對照) 四氧化三鐵(>98%,BR)Iron (II,III ) oxide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

(100mL酶解緩沖液) 10mL3-乙基-d5-腺嘌呤3-Ethyl-d5-adenine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

HGC-27人胃癌細胞(未分化) HGC-27 human gasic carcima cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS3-甲基-d3-腺嘌呤3-Methyl-d3-adenine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

IL13 Protein Cymolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白 (His 標簽)N1-氧基-腺嘌呤Adenine-N1-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
OLR1 Others Rat 大鼠 OLR1 / LOX1 人細胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 32,BR,可用于細胞培養(yǎng)Spirolactone

神經(jīng)細胞培養(yǎng)基NM-prf(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Spirolactone

SiHa細胞,人細胞 小鼠血細胞,WEHI-3細胞 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Azathioprine

Hela 299(人細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸巴尼地平質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRBarnidipine HCl

hMNC-CB pooled Pellet 人類臍帶血單核細胞混合團塊,超 > 1 mio.cells 人角膜上皮細胞總RNAHCEpiC NA鹽酸頭孢吡1 質(zhì)量規(guī)格:含量82.5%~91.1%(每毫克頭孢吡1含量,干品)Cefepime
燈心草染料法PCR鑒定試劑盒*NRK-52E 大鼠腎細胞單1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Acyclovir Mophosphate

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口Acyclovir-d4

Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞N2-乙酰基-9-2-乙酰氧基乙氧基甲基)(雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:美國進口N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)

人腦瘤細胞;SF763 大鼠頜下腺上皮細胞*培養(yǎng)基 1
實驗流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

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